Evaluation of the effect of natural peptide 'Urocortin' on corticotrophin releasing factor (CRF) receptor expression in ND7/23 cells

Resumo

Receptores de CRF estão envolvidos na gestão do estresse das células e são acreditados para ter um papel de cito-proteção no organismo. Os receptores do CRF têm sido relatados como alvos potenciais de fármacos para o tratamento de doenças neurodegenerativas. A linhagem celular utilizada no estudo é ND7/23 (neuroblastoma de camundongo e hibridoma de raíz dorsal do neurônio ganglionar de rato). O objetivo do estudo foi confirmar o que a expressão de receptores de CRF em células ND7/23 determinar se urocortina (Ucn) pode aumentar a expressão de receptores de CRF. Cultivaram-se células ND7/23 em meio RPMI 1640 e as células que cresceram após a segunda passagem foram usadas para os experimentos. O RNA foi extraído células e amplificado por RT-PCR para confirmar a presença de receptores de CRF. As células foram, então, submetidas a estresse oxidativo por peróxido de hidrogênio (0.00375 %) e divididas em dois grupos, ou seja, controle e tratadas com UCN (10-8 µM). Em seguida, o RNA foi extraído de ambos os grupo de células e realizou-se o PCR. Finalmente, realizou-se análise densitométrica em gel de agarose para determinar a quantidade de produto formado por PCR. O PCR confirmou a expressão de CRF-R1 e CRF-R2 na linhagem celular, mas o CRF-R1 expresso mais fortemente. A análise densitométrica do produto de PCR e o cálculo da expressão relativa de receptores de CRF indicaram um nível mais elevado de expressão de receptores de CRF em amostras tratadas com Ucn, em comparação com aqueles sem tratamento. Os resultados indicam que a Ucn pode ser útil no tratamento de doenças neurodegenerativas e mais estudos podem ser realizados para estabelecer seu uso como agente terapêutico.