Desenvolvimento de trinta e quatro novos locos de microssatélites e otimização de PCR multiplex de sete locos existentes para Zootoca vivipara (Squamata: Lacertidae)

Resumo

Existem poucos locos de microssatélites para o lagarto-comum-europeu, Zootoca vivipara, uma espécie-modelo comum em estudos de dinâmica de populações, seleção sexual, genética de populações, evolução do modo reprodutivo e fisiologia. Os oligonucleotídeos existentes não amplificaram em todas as linhagens, e a reação em cadeia da polimerase (PCR) multiplex não foi otimizada. Um total de 34 novos marcadores polimórficos de microssatélite foi desenvolvido para essa espécie e testado em 64 espécimes dos clados ovíparo e vivíparo (B e D). Os microssatélites foram combinados em sete diferentes agrupamentos . Os resultados mostraram que todos os locos, com uma única exceção, amplificaram com sucesso em todas as amostras e em ambos os clados. O número de alelos detectado por loco variou entre 7 e 22 e o número efetivo, entre 1,58 e 7,82. A heterozigosidade observada variou de 0,312 a 0,930, mostrando que todos os locos foram altamente variáveis. Os clados ovíparo e vivíparo exibiram diferenças genéticas significativas (em FST). Além desses novos marcadores, os sete locos de microssatélite previamente publicados e largamente utilizados foram otimizados em PCR multiplex e testados em clados ovíparos. Essas inovações permitirão análises rápidas e robustas em Zootoca vivipara, impulsionando estudos evolutivos e populacionais e facilitando análises de paternidade