Estudos radiométricos com o Mycobacterium tuberculosis

Resumo

A atividade metabólica do M. tuberculosis sob diversas condições experimentais foi estudada utilizando um sistema radiométrico automático, capaz de quantificar o 14CO2 produzido pela oxidação de substâncias marcadas com carbono-14. As experiências realizadas incluíram: a) vias metabólicas; b) determinação dos tempos de detecção para inoculações de diversas magnitudes; c) efeito da filtração sobre a reprodutibilidade dos resultados; d) influência de meio hostil; e) determinação das concentrações inibitórias mínimas para hidrazida, estreptomicina, etambutol e rifampicina f) tempo de duplicação para o M. tuberculosis e M. bovis. Estes microorganismos metabolizaram até 14CO2 o 14c-formato, (U-14C) acetato, (U-14C)glicerol, ácido palmítico, (1-14C) ácido láurico, ((U-14C) L-ácido málico, (U-14C) D glicose e (1-14C) D-glicose, mas não (1-14C) L-glicose, (U-14C) glicina ou (U-14C) piruvato. Usando 14C-formato, (1-14C) ácido palmítico ou (1-14C) ácido láurico foi possível detectar 10 bacilos/frasco em 24-48 horas e até 10 bacilos/ frasco em 16-20 dias. Resultados reprodutíveis foram obtidos sem filtrar a suspensão de bactérias, desde que cultivadas em meio 7H9 líquido com 0,05% de polissorbato 80 e homogenizadas antes da experiência. Drogas que bloqueiam a síntese protêica apresentaram concentração inibitória mínima menor com o método radiométrico do que com o convencional. O tempo médio de duplicação para o M. bovis e várias cepas de M. tuberculosis com diversas substâncias marcadas foi 9 ± 1 horas.