Expressão transiente em tecidos intactos de Stylosanthes guianensis (Aubl.) Sw. via eletroporação

Resumen

A transformação genética através da eletroporação de protoplastos foi estabelecida para espécies vegetais comercialmente importantes. Neste trabalho, fontes de explante, intensidades de campo elétrico, soluções de eletroporação, configuração da molécula de DNA e pré-tratamentos osmóticos foram avaliados para otimizar a expressão transiente do gene repórter em tecidos eletroporados de Stylosanthes guianensis, uma leguminosa forrageira tropical. Taxas elevadas de transformação foram obtidas empregando-se explantes cotiledonares e 250 V cm-1 de intensidade de campo elétrico. DNA plasmidial linear, solução de eletroporação livre de cloro e pré-tratamento osmótico com 1,6 mol L-1 de manitol favorecerem a expressão transiente do gene repórter, porém não significativamente. A amplificação por PCR específica do transgene foi usada para demonstrar a ocorrência de transformação nos tecidos.