Detecção de Leptospira pomona em sêmen bovino por eletroforese capilar fluorescente

Autores

  • Francisca Elda Ferreira Dias Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Ciências Agrárias e Veterinárias, Departamento de Medicina Veterinária Preventiva e Reprodução Animal, Jaboticabal, SP
  • Sérgio Morais Aoki Universidade Estadual Paulista, Instituto de Biociências, Departamento de Genética, Botucatu, SP
  • Lígia Garcia Mesquita Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Medicina Veterinária, Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Araçatuba, SP
  • Caris Maroni Nunes Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Medicina Veterinária, Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Araçatuba, SP
  • José Fernando Garcia Universidade Estadual Paulista, Faculdade de Medicina Veterinária, Departamento de Apoio, Produção e Saúde Animal, Araçatuba, SP

DOI:

https://doi.org/10.11606/issn.1678-4456.bjvras.2006.26488

Palavras-chave:

Sêmen Bovino, Leptospira, PCR, Eletroforese Capilar

Resumo

Este estudo pretendeu avaliar o limiar de detecção da técnica de PCR aliada à eletroforese capilar para diagnóstico da Leptospira pomona em sêmen bovino. Doses inseminantes livres de patógenos foram contaminadas experimentalmente com Leptospira pomona em escalas que variavam de 10(0) a 10(7) bactérias/ml e submetidas à extração de DNA pelo método de fenol/clorofórmio. Após a reação de PCR, a visualização dos fragmentos foi realizada em três tipos de eletroforese: agarose 2% sob luz UV, acrilamida 8% corado com prata e eletroforese capilar fluorescente. A detecção de DNA de Leptospira pomona em sêmen bovino através de eletroforese capilar fluorescente foi possível a partir de concentração de 10² bactérias/ml. Nos métodos de eletroforese em agarose 2%, observou-se limite de detecção de 10(4) bactérias/ml e em gel de poliacrilamida 8% o limite de detecção foi de 10² bactérias/ml. A eletroforese capilar demonstrou ser uma alternativa eficaz e rápida na detecção de DNA de Leptospira em sêmen bovino podendo ser uma valiosa ferramenta para controle de qualidade do sêmen produzido em centrais de inseminação artificial dada a facilidade de automação desse processo.

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Publicado

2006-06-01

Edição

v. 43 n. 3 (2006)

Seção

NÃO DEFINIDA

Licença

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Como Citar

1.
Dias FEF, Aoki SM, Mesquita LG, Nunes CM, Garcia JF. Detecção de Leptospira pomona em sêmen bovino por eletroforese capilar fluorescente. Braz. J. Vet. Res. Anim. Sci. [Internet]. 1º de junho de 2006 [citado 3º de julho de 2024];43(3):394-9. Disponível em: https://revistas.usp.br/bjvras/article/view/26488